双重固定方法至关重要，因为没有任何一种化学物质能够充分稳定皮肤组织中复杂的蛋白质和脂质混合物。 戊二醛用于固定蛋白质结构，而四氧化锇则用于固定脂质并提供必要的成像对比度。两者结合使用，可防止细胞结构在电子显微镜制备过程中严苛的脱水和包埋步骤中发生塌陷。
生物组织非常脆弱，并且天然对电子束是透明的。双重固定是您样本的基本“保险单”，它将不同的化学成分固定到位，以确保您看到的图像反映的是生物现实，而不是制备过程中的伪影。
建立结构框架
戊二醛的作用
戊二醛是样本保存的主要构建者。其特定功能是靶向组织内的蛋白质并对其进行交联。
稳定蛋白质支架
皮肤组织在形状和完整性方面在很大程度上依赖于蛋白质结构。戊二醛在蛋白质分子之间形成牢固的化学键，有效地将生物组织转化为稳定的凝胶状网络，抵抗降解。
保存膜的完整性和对比度
四氧化锇的作用
虽然戊二醛可以固定蛋白质，但它通常无法稳定脂质。引入四氧化锇来靶向皮肤的脂质成分，例如细胞膜。
固定脂质
四氧化锇通过氧化脂质充当次级固定剂。这种反应可防止脂肪和膜在后续处理步骤中被提取或溶解，这对于维持细胞结构的边界至关重要。
增加电子密度
除了固定作用外，四氧化锇还兼具重金属染色的双重作用。它显著增加了样本的电子密度，提供了电子显微镜分辨不同微结构所必需的对比度。
为什么需要协同作用
经受脱水和包埋
电子显微镜检查要求样本脱水（去除水分）并包埋在树脂中。这个过程在物理上是苛刻的，可能导致较软的组织收缩或变形。
防止结构变形
蛋白质交联和脂质氧化的结合创造了一个稳健的样本。这种双重固定最大限度地保留了原始微结构，确保皮肤组织在加工过程中保持其天然形态而不会发生结构损失。
理解部分固定的风险
跳过戊二醛的后果
如果没有初步的蛋白质固定，细胞质和结构基质仍然太弱。组织很可能在成像发生之前就崩解或发生显著的形态学变化。
跳过四氧化锇的后果
如果仅使用戊二醛，脂质则不会被化学固定。因此，在脱水过程中，膜结构可能会被冲走，导致出现“幽灵”细胞，其边界缺失且最终图像的对比度非常低。
确保高质量的成像结果
为确保您的电子显微镜分析数据的有效性，请根据您的具体成像需求应用正确的固定策略。
- 如果您的主要重点是整体细胞结构：确保戊二醛有足够的时间渗透并交联蛋白质基质，以防止收缩。
- 如果您的主要重点是膜分辨率或对比度：不要缩短四氧化锇的步骤，因为它单独负责脂质保留和可见密度。
您的显微镜检查的成功完全取决于这种初步的化学稳定，因为任何后处理都无法纠正固定不当的样本。
摘要表：
| 固定剂 | 靶向成分 | 主要功能 | 成像作用 |
|---|---|---|---|
| 戊二醛 | 蛋白质 | 交联蛋白质支架 | 维持结构完整性和框架 |
| 四氧化锇 | 脂质 | 氧化并固定膜 | 防止脂质流失并增加电子对比度 |
通过 Enokon 提升您的产品研发
在 Enokon，我们深谙有效透皮药物递送所需的复杂生物结构。作为值得信赖的制造商和批发合作伙伴，我们利用深厚的研发专业知识开发高质量的透皮贴片——包括利多卡因、薄荷醇、辣椒素和草本止痛解决方案，以及医用冷却凝胶。
无论您是在寻找定制研发还是批量生产，我们对科学严谨性的承诺都确保您的产品达到最高的功效标准。立即联系我们，讨论我们的定制解决方案如何帮助您为客户提供卓越的成果。
参考文献
- İsmail Tuncer Değim, Nese Demirez Lortlar. Transdermal Administration of Bromocriptine.. DOI: 10.1248/bpb.26.501
本文还参考了以下技术资料 Enokon 知识库 .
